การตรวจจับอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรง

หลักฐานโครงสร้างเนื้อเยื่อแอนติบอดีและเชื้อโรคผ่านการติดฉลากภูมิคุ้มกันเป็นที่นิยมทันสมัยและถูกต้อง Immunofluorescence หมายถึงการติดฉลากภูมิคุ้มกันด้วยแอนติบอดีเรืองแสงที่เตรียมไว้ซึ่งทำขึ้นเพื่อเรืองแสงภายใต้แสง UV

ที่ การตรวจจับอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรง สารตั้งต้นจะถูกตรวจสอบโดยตรงด้วยแอนติบอดีส่องสว่างโดยไม่มีแอนติบอดีหลักหรือแอนติเจนเทียม

การตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงคืออะไร?

การตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงเป็นวิธีการวินิจฉัยโดยอาศัยความรู้เกี่ยวกับภูมิคุ้มกันวิทยาภูมิคุ้มกันและอิมมูโนวิทยา จุดสำคัญอยู่ที่ความสามารถของแอนติบอดีในการจับกับจุดเฉพาะในเนื้อเยื่อหรือกับแอนติเจนในซีรั่ม สถานที่เหล่านี้เป็นตัวอย่าง

ในการวินิจฉัยทางชีวเคมีมีแอนติบอดีเทียมหรือเลียนแบบ (เอกพจน์: เลียนแบบ) ที่ทำให้พันธะแอนติบอดี - แอนติเจนเหล่านี้ถูกทำเครื่องหมายด้วยการเรืองแสงหรือกัมมันตภาพรังสี คอนจูเกตของแอนติบอดีประดิษฐ์จะจับมือข้างหนึ่งเข้ากับเอพิโทพและในทางกลับกันจะมีเครื่องหมายเรืองแสงในกรณีของอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ นี่เป็นอีกทางเลือกหนึ่งนอกเหนือจากการใช้เครื่องหมายกัมมันตภาพรังสี สิ่งพิเศษเกี่ยวกับการตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงเมื่อเทียบกับการตรวจทางอ้อมคือแอนติบอดีที่จับกับเอพิโทพีของแอนติเจนในวัสดุที่ตรวจสอบยังแสดงถึงการคอนจูเกตของแอนติบอดีด้วยเครื่องหมายเรืองแสง แอนติบอดีเพิ่มเติมไม่จำเป็นสำหรับการตรวจหาโดยตรง

Fluorescein ซึ่งส่องแสงภายใต้แสง UV และ fluorescein isothiocyanate (FITC) ใช้เป็นสีย้อมเพื่อสร้างคอนจูเกตแอนติบอดีเทียมในอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ จนถึงตอนนี้อ่านแล้วซับซ้อนเล็กน้อย แต่การตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงเป็นวิธีการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการทางการแพทย์มาตรฐานสำหรับคำถามทางการแพทย์ที่หลากหลาย แอนติบอดีที่มีสีย้อมเรืองแสงพร้อมจำหน่ายแล้ว

ฟังก์ชั่นผลและเป้าหมาย

การตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงมีไว้สำหรับการตรวจเนื้อเยื่อเพื่อหาคราบโครงสร้างบางอย่างในเนื้อเยื่อ แต่ยังมีให้สำหรับเซลล์เดียว Flow cytometry มีบทบาทสำคัญที่นี่ ในที่สุดก็มีภูมิคุ้มกันเฟสของแข็งและของเหลว การตรวจอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ของเนื้อเยื่อมีความสำคัญอย่างยิ่งในด้านเนื้องอกวิทยาเช่นการรักษาโรคมะเร็ง

สามารถตรวจพบแอนติเจนเฉพาะของเนื้องอกในเนื้อเยื่อเนื้องอกได้โดยตรงด้วยอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ การตรวจตัวอย่างเนื้อเยื่อจากเนื้องอกเหล่านี้มักมีความสำคัญเพื่อค้นหาว่าการแพร่กระจายที่มีอยู่มาจากไหนในร่างกายหรือเพื่อทำการตัดสินว่าเนื้องอกนั้นไม่เป็นพิษเป็นภัยหรือเป็นมะเร็ง การตรวจสอบเซลล์แต่ละเซลล์ด้วยการตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงใช้เพื่อค้นหาแอนติเจนของไวรัสแอนติเจนของแบคทีเรียและเอพิโทพอื่น ๆ

ตัวอย่างเช่นคุณสามารถตรวจสอบได้ว่าเซลล์ติดเชื้อไวรัสหรือไม่และเซลล์อยู่ในขั้นตอนใดของวงจรการติดเชื้อ ชื่อ FACS (= Fluorescence-Activated Cell Sorting) เป็นวิธีโฟลไซโตเมทรีที่มีประสิทธิภาพสูงซึ่งเซลล์ที่มีเครื่องหมายเรืองแสงจะกระจายไปยังหลอดทดลองที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับประเภทของสี ขั้นตอนนี้มีความสำคัญในด้านภูมิคุ้มกันวิทยาโลหิตวิทยาและโรคติดเชื้อ

อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ระบบภูมิคุ้มกันช่วยให้สามารถตรวจจับสารพิษจากสิ่งแวดล้อมสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรมและสารปรุงแต่งบางชนิดในอาหารได้โดยตรง ในการตั้งค่าการทดลองนี้จะมีเฟสของแข็งและของเหลวอยู่เสมอ นอกจากนี้ยังสามารถตรวจพบเชื้อโรคหลายชนิดรวมทั้งไวรัสเอชไอวีที่เป็นสาเหตุของโรคเอดส์ได้โดยตรง อย่างไรก็ตามเมื่อตรวจพบโรคติดเชื้อและแพ้ภูมิตัวเองมักเป็นเรื่องของการตรวจหาแอนติบอดีมากกว่าแอนติเจน เหล่านี้คือโมเลกุลป้องกันที่เกิดจากระบบภูมิคุ้มกันของร่างกาย ตามคำจำกัดความที่นำเสนอในที่นี้การพิสูจน์ดังกล่าวไม่ใช่การพิสูจน์โดยตรงเนื่องจากแอนติบอดีเรืองแสงไม่ได้จับคู่โดยตรงกับแอนติเจนของร่างกาย แต่เป็นแอนติเจนของการทดสอบ

แอนติเจนเหล่านี้ในชุดทดลองจะเชื่อมโยงกับแอนติบอดีของร่างกาย การตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงสำหรับการติดเชื้อทั่วไปเช่นไวรัสเอชไอวีและหนองในเทียมใช้เฉพาะในการตรวจพิเศษและการตรวจยืนยันเท่านั้น มีการทดสอบสำหรับโรคอื่น ๆ อีกมากมาย ในสถานการณ์ส่วนใหญ่การตรวจหาแอนติบอดีทางอ้อมเหมาะสำหรับโรคติดเชื้อเนื่องจากระบบภูมิคุ้มกันของร่างกายมีความสามารถในการจดจำการติดเชื้อครั้งก่อน ในสถานการณ์อื่น ๆ การตรวจหาแอนติเจนโดยตรงและการตรวจหาแอนติบอดีโดยอ้อมจะเสริมซึ่งกันและกัน หลังแสดงให้เห็นว่ามีการติดเชื้อเกิดขึ้นก่อนหน้านี้ในขณะที่ข้อมูลก่อนหน้านี้ให้ข้อมูลที่แม่นยำยิ่งขึ้นเกี่ยวกับสถานะปัจจุบันของกิจกรรมของเชื้อโรค

คุณสามารถหายาของคุณได้ที่นี่

ความเสี่ยงผลข้างเคียงและอันตราย

ด้วยการตรวจหาอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์โดยตรงเช่นเดียวกับหลักฐานทางการแพทย์ทั้งหมดมีความเสี่ยงสองประการคือความเสี่ยงที่จะเกิดผลที่เป็นเท็จผลบวกและความเสี่ยงที่จะได้ผลลัพธ์ที่ผิด ผลลัพธ์ที่เป็นเท็จทำให้เกิดความรู้สึกไม่สบายทางจิตใจและความเครียดอย่างมากสำหรับผู้ป่วย

ดังนั้นจึงมีการเพิ่มขั้นตอนการทดสอบเพิ่มเติมเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่เป็นบวกโดยเฉพาะอย่างยิ่งหากการวินิจฉัยนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงชีวิตที่รุนแรง ความเสี่ยงของผลลัพธ์ที่ผิดพลาดและเป็นลบคือผู้ป่วยไม่ได้เรียนรู้เกี่ยวกับภัยคุกคามต่อสุขภาพของตัวเองและอาจถึงกับสุขภาพของประชาชนในเวลาที่เหมาะสม ดังนั้นจึงเป็นการดีที่จะทำการวิจัยจำนวนมากและจัดทำและนำเสนอเครื่องตรวจจับอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ที่แตกต่างกันจำนวนมากพร้อมจำหน่าย ร่วมกับวิธีการตรวจหาโรคและพยาธิสภาพทางตรงและทางอ้อมอื่น ๆ จะช่วยเพิ่มความแม่นยำในการวินิจฉัย

การตรวจจับโดยตรงขึ้นอยู่กับคอนจูเกตของแอนติบอดีซึ่งในมือข้างหนึ่งจะจับกับเอพิโทพของแอนติเจนและในทางกลับกันก็ทำให้เกิดการเรืองแสงด้วย ดังนั้นผลิตภัณฑ์ดังกล่าวจึงใช้ในขั้นตอนการทดสอบประเภทเดียวเท่านั้นและไม่ได้ใช้สำหรับขั้นตอนการทดสอบประเภทอื่น ๆนี่เป็นความแตกต่างของขั้นตอนที่สำคัญสำหรับหลักฐานทางอ้อมซึ่งแอนติบอดีเรืองแสงนำหน้าด้วยแอนติบอดีหลักสำหรับการจับเอพิโทพี คอนจูเกตของแอนติบอดีจึงเหมาะสำหรับการทดสอบที่แตกต่างกัน ความแตกต่างของขั้นตอนนี้แตกต่างจากความแตกต่างทางการแพทย์ระหว่างการตรวจหาแอนติบอดีทางอ้อมและการตรวจหาแอนติเจนโดยตรง